在分析工作中,洗涤玻璃仪器不仅是一个实验前的准备工作,也是一个技术性的工作。仪器洗涤是否符合要求,对分析结果的准确度和精确度均有影响。不同分析工作(如工业分析、一般化学分析和微量分析等)有不同的仪器洗涤要求,我们以一般定量化学分析为基础介绍玻璃仪器的洗涤方法。
洗涤仪器的一般步骤
1.用水刷洗:使用用于各种形状仪器的毛刷,如试管刷、瓶刷、滴定管刷等。首先用毛刷蘸水刷洗仪器,用水冲去可溶性物质及刷去表面粘附灰尘。
2.用合成洗涤水刷洗:市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中性洗液,可配制成1—2%的水溶液,也可用5%的洗衣粉水溶液,刷洗仪器,它们都有较强的去污能力,必要时可温热或短时间浸泡。洗涤的仪器倒置时,水流出后,器壁应不挂小水珠。至此再用少许纯水冲仪器三次,洗去自来水带来的杂质,即可使用。
各种洗涤液的使用
针对仪器沾污物的性质,采用不同洗涤液能有效地洗净仪器。要注意在使用各种性质不同的洗液时,一定要把上一种洗涤液除去后再用另一种,以免相互作用生成的产物更难洗净。
铬酸洗液因毒性较大尽可能不用,近年来多以合成洗涤剂和有机溶剂来除去油污,但有时仍要用到铬酸洗液,故也列入表内。
洗涤液及其配方 | 使用方法 |
① 铬酸洗液 研细的重铬酸钾20g溶于40mL水中,慢慢加入360mL浓硫酸。 | 用于去除器壁残留油污,用少量洗液刷洗或浸泡一夜,洗液可重复使用。 |
②工业盐酸(浓或1:1) | 用于洗去碱性物质及大多数无机物残渣。 |
③碱性洗液10%氢氧化钠水溶液或乙醇溶液。 | 水溶液加热(可煮沸)使用,其去油效果较好。注意:煮的时间太长会腐蚀玻璃,碱—乙醇洗液不要加热。 |
④碱性高锰酸钾洗液4g高锰酸钾溶于水中,加入10g氢氧化钠,用水稀释至100mL。 | 洗涤油污或其他有机物,洗后容器沾污处有褐色二氧化锰析出,再用浓盐酸或草酸洗液、硫酸亚铁、亚硫酸钠等还原剂去除。 |
⑤草酸洗液5—10g草酸溶于100mL水中,加入少量浓盐酸。 | 洗涤高锰酸钾洗液后产生的二氧化锰,必要时加热使用。 |
⑥碘—碘化钾洗液1g碘和2g碘化钾溶于水中,用水稀释至100mL。 | 洗涤用过硝酸银滴定液后留下的黑褐色沾污物,也可用于擦洗沾过硝酸银的白瓷水槽。 |
⑦有机溶剂苯、乙醚、二氯乙烷等。 | 可洗去油污或可溶于该溶剂的有机物质,使用时要注意其毒性及可燃性。用乙醇配制的指示剂干渣,比色皿,可用盐酸—乙醇(1:2)洗液洗涤。 |
⑧乙醇、浓硝酸注意:不可事先混合! | 用一般方法很难洗净的少量残留有机物,可用此法:于容器内加入不多于2mL的乙醇,加入10mL浓硝酸,静置即发生激烈反应,放出大量热及二氧化氮,反应停止后再用水冲,洗操作应在通风橱中进行,不可塞住容器,作好防护。 |
常用器皿的清洗
1.砂芯玻璃滤器的洗涤
(1)新的滤器使用前应以热的盐酸或铬酸洗液边抽滤边清洗,再用蒸馏水洗净。
(2)针对不同的沉淀物采用适当的洗涤剂先溶解沉淀,或反复用水抽洗沉淀物,再用蒸馏水冲洗干净,在110℃烘箱中烘干,然后保存在无尘的柜内或有盖的容器内。若不然积存的灰尘和沉淀堵塞滤孔很难洗净。表2 列出一些洗涤砂芯滤板的洗涤液可供选用。
沉淀物 | 洗涤液 |
AgCl | 1:1氨水或10% Na2S2O3水溶液。 |
BaSO4 | 100℃浓硫酸或用EDTA— NH3水溶液(3%EDTA二钠盐500mL与浓氨水100mL混合)加热近沸。 |
汞渣 | 热浓硝酸。 |
有机物质 | 铬酸洗液浸泡或温热洗液抽洗。 |
脂肪 | 四氯化碳或其他适当的有机溶剂。 |
细菌 | 化学纯浓硫酸5.7mL,化学纯亚硝酸钠2g,纯水94mL充分混匀,抽气并浸泡48h后,以热蒸馏水洗净。 |
2.初用玻璃仪器的清洗
新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质,可先用0.5%的去污剂洗刷,再用自来水洗净,然后浸泡在1%~2%盐酸溶液中过夜(不可少于四小时),再用自来水冲洗,最后用无离子水冲洗两次。
3.使用过的玻璃仪器的清洗
先用自来水洗刷至无污物,再用合适的毛刷沾去污剂(粉)洗刷,或浸泡在0.5%的清洗剂中超声清洗(比色皿决不可超声),然后用自来水彻底洗净去污剂,用无离子水洗两次,烘干备用(计量仪器不可烘干)。清洗后器皿内外不可挂有水珠,否则重洗,若重洗后仍挂有水珠,则需用洗液浸泡数小时后(或用去污粉擦洗),重新清洗。
4.石英和玻璃比色皿的清洗
决不可用强碱清洗,因为强碱会浸蚀抛光的比色皿。只能用洗液或1% ~2%的去污剂浸泡,然后用自来水冲洗,这时使用一支绸布包裹的小棒或棉花球棒刷洗,效果会更好,清洗干净的比色皿也应内外壁不挂水珠。
5.塑料器皿的清洗
聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿,在生物化学实验中已用的越来越多。第一次使用塑料器皿时,可先用8mol/L尿素(用浓盐酸调pH = 1)清 洗,接着依次用无离子水、1 mol/L KOH和无离子水清洗,然后用10—3 mol/L EDTA 除去金属离子的污染,最后用无离子水彻底清洗, 以后每次使用时,可只用0.5%的去污剂清洗,然后用自来水和无离子水洗净即可。
6.菌检用玻璃仪器的洗涤
(1)试管 使用过的试管经消毒后将培养基倒出刮出。用洗涤剂洗刷,然后用自来水冲洗4~5次。将试管倒立,内外冲洗干净,再用蒸馏水冲洗1次,晾干备用。
(2)培养皿 使用过的培养皿经规定条件灭菌后30分钟,将培养基倒出或刮出(新的培养皿无此程序,直接刷洗),用毛刷蘸洗涤刷洗耳恭听培养皿内外,再用自来水冲洗染4 -5次,用蒸馏水冲洗1次,晾干或烤干备用。培养皿如被抗生素或消毒剂污染,则应在清洁液内浸泡过夜后,再用水冲洗数次,蒸馏水冲洗1 次。
(3)吸管 使用过的吸管,经消毒后,用流水冲洗,冲去吸管上端的棉花(新的吸管无此程序,直接浸泡),放入清洁液内浸泡过夜,用水冲洗数次,再用蒸馏水冲洗1 次,倒立干燥备用。
(4)容量瓶 清洁液浸泡过夜,用水及节馏水冲洗干净备用。
特殊要求的洗涤方法
在用一般方法洗涤后用蒸汽洗涤是很有效的。有的实验要求用蒸汽洗涤,方法是烧瓶安装一个蒸汽导管,将要洗的容器倒置在上面用水蒸汽吹洗。
某些测量痕量金属的分析对仪器要求很高,要求洗去ug级的杂质离子,洗净的仪器还要浸泡至1:1盐酸或1:1硝酸中数小时至24h,以免吸附无机离子,然后用纯水冲洗干净。有的仪器需要在几百摄氏度温度下烧净,以达到痕量分析的要求。
关于是否可以使用毛刷
可以分为两类:一种是毛刷可洗,另一种是毛刷不可洗。
(1)能用毛刷刷洗的玻璃器皿的清洗
能用毛刷刷洗的玻璃器皿有试管、烧杯、试剂瓶、锥形瓶、量筒等广口玻璃仪器,其清洗方法如下:
①用水洗根据要洗涤的玻璃仪器的性状选择合适的毛刷,如试管刷、烧杯刷、平刷、滴定管刷等。用毛刷蘸水洗刷,可使溶性物质溶去,也可使附着在玻璃仪器上的尘土和不溶物脱落下来,但往往洗不去油污和有机物质。
②用洗涤剂洗蘸取洗涤剂(如洗衣粉),仔细刷洗玻璃仪器内外壁(特别是内壁)。为了提高洗涤效率,可将洗涤剂配成1%~5%的水溶液,加温浸泡要洗的玻璃仪器片刻后,再用毛刷反复刷洗。对污物粘附较紧的玻璃仪器,可在上述洗涤液中加入适量去污粉。刷洗后用自来水冲洗干净。若仍有油污,可用铬酸洗液来浸泡,使用时先将要洗涤玻璃器皿内的水液倒尽,再将铬酸洗液倒入欲洗涤的玻璃器皿中浸泡数分钟至数十分钟,如将洗液预先温热,则收效更好。
刷洗后的玻璃器皿和铬酸洗液浸泡后的玻璃器皿用自来水反复冲洗,彻底冲洗干净洗涤剂(如果洗涤剂没有洗净,装水后弯月面变平),再用蒸馏水或去离子水漱洗2~3次。将漱洗后的玻璃器皿置于器具架上自然沥干,或置100~130℃的烤箱中烘干。
(2)不能用毛刷刷洗的玻璃器皿的清洗
①吸量管、移液管、容量瓶等小口玻璃量器,使用后应立即浸泡于凉水中,勿使沾污物质干涸。工作完毕后用流水冲洗,初步除去附着的试剂、蛋白质等物质。晾干后浸泡于铬酸洗液中4~6h或过夜,然后用自来水充分冲洗干净,再用蒸馏水或去离子水漱洗2~3次,置于量器架上自然干燥。急用时可置烤箱中在80℃以下烘干,或于量器中加入少量无水乙醇或甲醇、乙醚之类溶剂,慢慢转动使其布满整个容器内壁,然后倒出,再吹干或加负压抽干,即可达到快速干燥的目的。
对分析致癌性物质或氰化物等剧毒物质容器洗涤时,为防止对人体的危害,在洗涤之前,要使用对这些有害物质有破坏作用的洗涤液进行浸泡,然后再进行洗涤。分析氰化物的容器可用3%NaOH溶液浸泡消毒,然后用常规方法清洗。
不同项目取样容器的洗涤
1、用于检测重金属的水样的容器用1:4HNO3浸泡24h以上,取出后常规方法清洗。
2、检测微量有机物的水样的容器用铬酸洗液洗净烘干后,再用纯化过的己烷振摇除去器壁表面沾污的有机物,也可用高锰酸钾洗液浸洗后再用自来水和纯水冲洗干净。
3、检测阴离子表面活性剂水样的容器要用洗涤剂刷洗后,再用甲醇振摇1min,再依次用自来水、纯水冲洗干净;检测微生物水样的容器,用常规洗涤后,将玻璃器皿放置于高压灭菌锅中加热至121℃保持15min,予以灭菌。塑料容器浸泡在0.5%过氧乙酸溶液中10min或在环氧乙烷气体中进行低温灭菌。
4、聚丙烯耐热塑料容器可用高压灭菌锅121℃高压蒸汽灭菌15min。
5、测汞的水样容器要用1:3HNO3充分荡洗并浸置数小时,然后用自来水和超纯水冲洗干净;测微量硫酸盐水样的容器不能使用含硫酸的洗液洗涤。
6、测铬水样的容器不能用盐酸或重铬酸钾的洗液洗涤。
7、测磷酸盐的水样的容器不能用含磷的洗液洗涤。
8、测氨和凯氏氮水样的容器最后要用无氨水涮洗。
实验室常用洗液的制备方法
碱性高锰酸钾洗液(用于洗涤油污或其它有机物):称取4g高锰酸钾于烧杯中,加入少量水使之溶解,向该溶液中慢慢加入100ml10%氢氧化钠溶液,混匀后储存在带有橡皮塞的玻璃瓶中备用。
铬酸洗液(用于洗涤油污):称取10gK2Cr2O7置于烧杯中,加20ml水溶解后,慢慢加入180ml硫酸,边加边搅拌。配制好的溶液应呈红棕色。待溶液冷却后转入玻璃瓶中备用,因浓硫酸易吸水,应用磨口塞子塞好。
碱性乙醇洗液(用于洗涤油污):溶解120g氢氧化钠于150ml水中,用95%乙醇稀释至1000ml即可。
20%硝酸洗液(用于洗涤金属氧化物及金属离子):在800ml蒸馏水中慢慢加入200ml硝酸,边加边搅拌,搅拌均匀即可。
酸性硫酸亚铁洗液(用于洗涤MnO2•nH2O沉淀物或部分氧化物):取20g硫酸亚铁与硫酸10ml,加水至100ml即得。
VC洗液(用于洗涤MnO2•nH2O沉淀物):称取10gVC,溶于100mL水中即得。
盐酸-乙醇洗液(用于洗涤被染色玻璃器皿):在100ml95%乙醇中,缓缓加入50ml浓盐酸,边加边搅拌,搅拌均匀即可。
盐酸(1:1)洗液(用于洗涤碱性物质及大多是无机物残渣):在100ml水中慢慢加入100ml浓盐酸,边加边搅拌,搅拌均匀即可。
2%盐酸(用于洗涤一般碱性物质):在95ml水中慢慢加入5mL浓盐酸,边加边搅拌,搅拌均匀即可。
在洗液配制的过程中,操作人员需要佩戴好必要的防护用品,如防护眼镜、防毒口罩、橡胶手套等,防止被化学物品损伤。
实验室玻璃器皿上的标记通常用记号笔或者纸质不干胶贴,记号笔标注比较方便所以常用,可是对于清洗人员来说这却是一个大麻烦,通常需要每根每件单独去处理,用去污粉、用酒精擦洗,用酒精喷洗,用酒精整体浸泡,也有考虑用超声加特定清洗剂进行前处理的。
微生物实验室培养用品的清洗与消毒!
(一) 清洗
在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同的清洗方法。
1、玻璃器皿的清洗
组织细胞培养中,使用量最大的是玻璃器皿,故工作最大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、侵酸和冲洗四个步骤。清洗后的玻璃器皿仅要求干净透明无油迹,而且不能残留任何物质。
(1)浸泡:初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡,以使附着物软化或被溶液掉。新的初次使用的玻璃器皿,在生产及运输过程中,玻璃表面带有大量的干固的灰尘,且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等。新瓶使用前应先用自来水简单刷洗,然后用稀盐酸液浸泡过夜,以中和其中的碱性物质。再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的蛋白质,干固后不易洗掉,故用后要立即浸入水中,且要求完全浸入,不能留有气泡或浮在液面上。
(2)刷洗:浸泡后的玻璃器皿一般要用毛刷沾洗涤剂刷洗,以除去器皿表面附着较牢的杂质。刷洗要适度,过度会损害器皿表面光泽度。
(3)浸酸:清洁液是由zhongluosuanjia、浓硫酸和蒸馏水按一定比例配制而成,其处理过程称为浸酸。清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用,而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质。清洁液去污能力很强。是清洗过程中关键的一环。浸泡时器皿要充满清洁液,勿留气泡或器皿露出清洁液面。浸泡时间一般为过夜,不应少于6小时。
清洁液配制时应注意安全,须穿戴耐酸手套和围裙,并要保护好面部及身体裸露部分。配制过程中可使用重铬酸钾溶于水中,然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌,使产生的热量挥发,配制过程中可使重铬酸钾溶于水中,然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌,使产生的热量挥发,配制溶液应选择塑料制品。配成后清洁液一般为棕红色。
(4)冲洗:玻璃器皿在使用后,刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。使之尽量不留污染或洁液的残迹。冲洗zuihao用洗涤装置。即省力、效果又好。如用手工操作,则需流水冲洗十次以上,每天水须灌满及倒干净,最好用蒸馏水清洗3-5次,晾干备用。
保存
1、经常使用的玻璃仪器放在防尘的仪器存放柜内,存放要分门别类,便于取用。
2、移液管洗净后置于防尘的盒中。
3、滴定管用后,倒去内装的溶液,洗净后装满纯水,上盖玻璃短试管或塑料套管,也可倒置夹于滴定管架上。
4、比色皿用毕洗净后,在瓷盘或塑料盘中垫上滤纸,倒置晾干后装入比色皿盒或清洁的器皿中。
5、带磨口塞的仪器,如容量瓶、比色管最好在洗净前就用橡皮筋或线绳把塞和管口栓好,以免打破塞子或互相弄混。需长期保存的磨口仪器要在塞子间垫一张纸片,以免日久粘住。长期不用的滴定管要除掉凡士林后垫纸,用皮筋栓好活塞保存。
6、成套仪器如索氏萃取器、气体分析器等用完要立即洗净,放在专门的纸盒里保存。