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无菌检验员证书微生物化验员资格证培训含金量高-微生物检测用器材消毒灭菌规范
一、无菌操作技术规范
（一）人员防护要求
1. 基础防护：进行无菌操作前，操作人员须穿戴整洁的工作服、帽子及口罩。帽子应完全遮盖头发，口罩须覆盖口鼻，并修剪指甲、洗手。
2. 专项防护：接种食品样品时，须穿戴专用工作服、帽及拖鞋，存放于无菌室缓冲间，使用前经紫外线消毒。
3. 手部消毒：进入无菌室前，须用肥皂洗手，再用75%酒精棉球擦拭手部至干燥。
（二）物品管理规范
1. 分类存放：无菌物品与非无菌物品须分开放置，无菌物品须置于无菌包或无菌容器内，避免暴露于空气中。已取出的无菌物品未使用不可放回。
2. 标识管理：无菌包须注明物品名称、消毒日期，按日期顺序排放于固定位置。未污染情况下，无菌包保存期为7-14天，过期须重新灭菌。
3. 使用限制：开包后的无菌包、开封后的无菌溶液有效期为24小时，无菌盘有效期不超过4小时。
（三）操作流程规范
1. 持物钳使用：取用无菌物品须用无菌持物钳，钳端不可触及容器口边缘及溶液以上内壁。使用后立即放回容器，不可倒转向上。无菌持物钳及其容器每周清洁消毒两次，门诊换药室每日消毒一次。
2. 溶液使用：倾倒无菌溶液时，不可堵塞瓶口或直接伸入瓶内蘸取。瓶塞翻转消毒后盖严，注明开瓶时间。
3. 污染处理：无菌物品疑有污染或已污染须立即更换或重新灭菌。无菌包浸湿或内物污染须重新消毒。
（四）特殊场景操作
1. 酒精灯前操作：接种样品、转种细菌须在酒精灯火焰周围250px范围内进行。吸管取出后及试管塞打开须通过火焰消毒。
2. 吸管使用：从包装中取出吸管时，尖端不可触及外露部位；接种时尖端不可触及试管或平皿边缘。吸取菌液须用橡皮头，禁止口吸。
3. 接种环处理：接种环使用前须经火焰烧灼全部金属丝，结核菌及烈性菌接种环须沸水煮沸5分钟后再烧灼。
二、无菌间使用规范
（一）空间要求
1. 结构密封：无菌间通向外部的窗户须为双层玻璃并密封，配备缓冲间及推拉门，设0.5-0.7平方米传递窗。
2. 清洁维护：工作后用2%-3%煤酚皂溶液擦拭台面，禁止存放无关物品。空调须配备过滤装置。
（二）消毒要求
1. 紫外线消毒：使用前后关紧门，开启30W紫外线灯（距离1.0m）照射≥30分钟。灯管每两周用酒精棉球擦拭灰尘。
2. 物品传递：操作期间禁止随意出入，须通过传递窗交接物品。
三、消毒灭菌技术规范
（一）灭菌方法选择
1. 湿热灭菌：适用于培养基、手术敷料等耐高温高湿物品，采用121℃、15-20分钟高压蒸汽灭菌。
2. 干热灭菌：适用于玻璃器皿、油性制剂等耐高温干燥物品，采用160℃、2小时热空气灭菌。
3. 金属用具处理：高压灭菌或95%酒精点燃烧灼三次后使用。
（二）灭菌前准备
1. 物品包装：玻璃器皿（如吸管、平皿）用纸严密包装，金属筒须打开通气孔；培养基三角瓶塞用纸包好，试管盖紧，注射器抽出管芯用纱布包好。
2. 装载要求：干热灭菌器内物品不可过挤且不接触箱壁；高压蒸汽锅内物品分包扎好，避免过挤。
（三）设备操作规范
1. 手提式高压锅：
· 加水：主体内加入3L清水（重复使用需补足，水混浊须更换）。
· 排气：顶盖排气管插入消毒桶方管，加热至水沸腾后排气10-15分钟。
· 灭菌：关闭排气阀，维持规定压力及时间。
· 冷却：干燥物品立即排气，60℃以下开盖；液体物品自然冷却至60℃以下开盖。
2. 卧式高压锅：
· 预热：关紧锅门，引入蒸汽预热夹层，冷空气自动排出。
· 灭菌：夹层达预定温度后，引入蒸汽至锅室，冷空气自动排出。
四、监测与维护规范
（一）效果监测
1. 定期检测：每批次灭菌物品须进行生物监测（如芽孢试验）及化学监测（如指示卡变色）。
2. 记录管理：建立灭菌日志，记录温度、压力、时间等参数，保存期≥3年。
（二）设备维护
1. 日常检查：每次使用前检查门开关、橡皮圈、压力表零位。
2. 专项维护：紫外线灯管效率下降时更换；高压锅安全阀每年校验一次。
五、人员培训与管理
（一）培训要求
1. 操作培训：所有操作人员须通过无菌技术考核，掌握消毒剂配制、灭菌设备操作等技能。
2. 应急处理：定期演练污染事件处置流程，如灭菌失败物品的召回与重新处理。
（二）管理责任
1. 制度建设：医疗机构须建立消毒管理组织，制定消毒管理制度，定期开展效果检测。
2. 违规处罚：违反本规范导致感染事故的，依法追究相关人员责任。
附件：
1. 《无菌物品存放与使用记录表》
2. 《灭菌设备操作维护手册》
3. 《消毒剂浓度监测标准》
本规范自发布之日起实施，由XX微生物检测中心负责解释及修订。
